Celulele Stem Mezenchimale din Tesutul Cordonului Ombilical folosite pentru a trata Grefa-versus-Boala Proprie

Grefa-versus-Boala Proprie (GvHD) este o complicatie frecventa si grava in urma unui transplant de celule stem de la un donator neinrudit. GvHD este impartita in forma acuta  si cronica in functie de evolutia clinica si timpul de diagnostic. Aceasta este o conditie ce pune viata in pericol, care contribuie foarte mult la mortalitate precoce dupa transplanturile cu celule stem. Supravietuitorii pot suferi daune ale organelor sau poate fi afectata calitatea vietii.

Prima linie de prevenire si tratament pentru GvHD sunt steroizii. Cand GvHD nu raspunde la steroizi sau nu este rezolvata prin steroizi se spune ca este "steroid-refractar". In aceasta situatie, exista multe terapii de linia a doua, dar nici una dintre ele nu este considerata a fi in mod clar superioara si cea mai eficienta.

Celulele Stem Mezenchimale (MSC), datorita proprietatilor lor imunitare unice, au un mare potential ca o optiune de tratament pentru steroizi-refractar GvHD. Un atribut al celulelor stem mezenchimale este ca donatorul si pacientul nu trebuie sa fie potriviti, astfel incat celule stem mezenchimale pot fi usor furnizate de la o banca de donatori. Un alt atribut util este faptul ca multe studii arata ca MSC au tendinta de a suprima reactiile autoimune si astfel potentialul ar putea suprima conflictul dintre grefa si gazda sistemului imunitar. Mai mult decat atat, MSC pot fi furnizate intravenos, fiind foarte convenabil pentru pacient.

In acest articol ne-am raportat la o serie de pacienti tratati pentru Grefa-versus-Boala Proprie (GvHD) in Polonia cu celule stem mezenchimale din Gelatina Wharton a Tesutului Ombilical (WJ-MSC). Gelatina Wharton este o sursa abundenta de Celule Stem Mezenchimale (CSM) cu mai multe avantaje: recoltarea tesutului ombilical este non-invaziva si celulele stem mezenchimale sunt usor de izolat si MSC provenite din tesutul cordonului ombilical au un nivel ridicat de proliferare si capabilitati de diferentiere.

Zece pacienti au fost tratati de GvHD in anii 2011-2013 la patru clinici diferite din Polonia. Ei au suferit tratament cu CSM derivate din Gelatina Wharton ca o terapie de salvare pentru Grefa-versus-Gazda Bolii (GvHD). Fiecare cerere a fost precedata de aprobarea comisiei bioetice. Varstele pacientilor au variat intre 3 si 20 de ani. Printre ei au fost trei oameni cu GvHD cronica extinsa si sapte cu GvHD acuta, dintre care sase pacienti cu gradul IV si unul cu gradul III.

Pacientii au primit initial transplanturi cu celule stem din cauza urmatoarelor boli care stau la baza: leucemie acuta limfoblastica (ALL), leucemie mieloida acuta (LMA), sindrom mielodisplazie (MDS) transformat in AML, MDS, anemie aplastica severa si limfom non-Hodgkin. Toti pacientii nu au raspuns la prima linie GvHD terapie cu steroizi si au avut raspuns nesatisfacator la terapiile de linia a doua, inclusiv: ciclosporina A, micofenolatul de mofetil, tacrolimus, antitimocitara globulina, etanercept, imunoglobuline intravenos, extracorporala photopheresis si anticorpi monoclonali.

Pacientii GvHD au primit 1-3 perfuzii intravenoase de Gelatina Wharton-Celule Stem Mezenchimale de la cativa donatori, terte parti intr-un interval de 1-2 saptamani. Ei au primit o doza medie totala de 1,5 milioane de celule per Kg din greutatea corporala. Gelatina Wharton a fost izolata prin disectia mecanica a cordonului ombilical recoltat, apoi celulele plastic-aderente (MSC) au fost izolate fara tratament enzimatic, cultivate si crioconservate in azot lichid. Procesarea in laborator a avut loc intr-un mediu GMP ISO 5. Esatioanele de referinta de celule stem mezenchimale au fost folosite pentru a verifica numarul de celule, viabilitatea si imunofenotipul. Celulele stem mezenchimale au fost administrate imediat dupa decongelare.

Pacientii au fost monitorizati pentru efectele adverse in timpul perfuziei si a perioadei de urmarire. Timpul median de observatie a fost de 9,5 luni. Nu au fost efecte adverse descrise in timpul sau dupa aplicarea Gelatinei Wharton-Celule Stem Mezenchimale in afara de tahicardie tranzitorie care dispare fara interventie.

Sase din cei zece pacienti GvHD au raspuns la terapie si dozele lor de tratament imunosupresor ar putea fi reduse, inclusiv un caz cu GvHD cronica care a prezentat o ameliorare la 3 luni de la aplicarea celulelor mezenchimale. Doi pacienti au raspuns complet si au fost eliminate simptomele GvHD. Primul pacient vindecat a fost o fetita in varsta de 7 ani cu gradul al IV-lea intestinal acut GvHD care a avut un transplant pentru TOATE in a doua remisie. Al doilea pacient care a eliminat simtomele a fost un baiat in varsta de 3 ani cu gradul IV de piele si intestinal acut GvHD care a suferit de MDS transformat in AML. Ambii pacienti vindecati au primit tratament cu celule stem mezenchimale la scurt timp dupa diagnosticarea cu GvHD. Din cei patru pacienti ramansi care au raspuns la terapie, doi dintre ei au limitat GvHD cronica (anterior a fost extins), iar unul a murit la 3 luni dupa infuzia cu MSC din cauza sangerarii nervos centrale si brusc stop cardiac. Ultimul pacient este in curs de evaluare, insa la 1 luna dupa tratamentul cu celule stem mezenchimale gradul de severitate GvHD al pacientului a scazut de la IV la I.

Dintre cei patru din zece pacienti care nu au raspuns la terapie, unul este stabil cu GvHD extins cronic si ceilalti trei au murit: doi din cauza avansarii GvHD si a sepsisului si unul (cu gradul IV GvHD acut cu pielea, intestinal  si implicare hepatica) din cauza comei hepatice. Nu au avut loc recedive sau noi tumori maligne in perioada de urmarire.

Aplicabilitatea Gelatinei Wharton - derivat de celule stem mezenchimale de la terti donatori este o procedura sigura care aduce efecte clinice, chiar atunci cand este administrata ca o terapie de salvare. La mai mult de jumatate dintre acesti pacienti, infuzia cu Gelatina Wharton-Celule Stem Mezenchimale a ameliorat simptomele de GvHD si le-a permis sa reduca tratamentul imunosupresor. Pentru o cincime din pacienti, terapia cu WJ-MSC a dus la disparitia simptomelor GvHD. Rezultatele pareau sa fie imbunatatite atunci cand timpul intre diagnostic si infuzia cu MSC era mai scurt.

In prezent, celulele stem mezenchimale sunt considerate oficial ca tratament de linia a doua pentru GvHD acuta. Cu toate aceastea sunt necesare studii suplimentare pentru a stabili timpul perfuziei, dozele de celule optime, precum si numarul de injectii si intervalele intre ele. Aceste cazuri au fost publicate intr-o carte de la a 40-a Intalnire Anuala a Grupului European pentru Sange si Transplantul de Maduva.